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无菌室建设的无菌测试

2020-07-22 15:08:45


微生物检测人员天天都需要在无菌室工作,在超净台或者生物安全柜里操作,为了保证我们检测的准确性,我们必须要求无菌室以及工作台符合要求,那我们应该怎样进行验证呢?下面给您介绍一下环境中无菌或杀菌效果应如何检查。  

 

一、紫外灯杀菌效果检查  紫外灯在使用过程中辐射强度会逐渐降低,影响其杀菌效果,故应该定期检查。紫外灯的杀菌有效波长是253.7nm,其强度可以用中心波长254nm的紫外线强度计测定。在没有紫外线强度计的情况下可以采用生物学替代。 

 

生物学测试简要步骤如下:


选用枯草芽孢杆菌ATCC 9372,制成106CFU/mL~108CFU/mL浓度的菌悬液;选用经脱脂处理的0.5cm×1.0cm大小的布片或铝片,高压灭菌后用作载体;每个载体上滴一滴制备好的菌悬液,干燥后备用;将8个染菌载体放于无菌器皿中,置于紫外灯下1m~1.5m处,开启紫外灯照射,于0.5h1h1.5h2h各取出2个染菌载体,分别投入盛有5mL缓冲蛋白胨水的洗脱液;系列稀释后进行平板计数;同法取8个染菌载体用做阳性对照,操作除不经紫外此昂照射外与试验组相同。杀灭率=(阳性对照回收菌数-试验组回收菌数)/阳性对照回收菌数×100%  杀灭率大于99.9%时,认为紫外灯杀菌效果合格。  


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